超凈工作臺是細胞培養(yǎng)實驗室(laboratory)中必不可少的
 

　　一、實驗室設(shè)計(design)
  細胞培養(yǎng)是一種無菌(意思：沒有活菌)操作技術(shù)，要求工作(gōng zuò)環(huán)境(environment)和條件必須保證無微生物(biological)污染和不受其它有害因素的影響(influence)。細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔，空氣清新，干燥和無煙塵。細胞培養(yǎng)室的設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。
 

　　二、常用設(shè)施及設(shè)備(shèbèi)
  1、超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式，直流式和外流式三大類。
  2、無菌（fungus)操作控制間：一般由更衣間，緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧(Oxygen)化碳(C)培養(yǎng)箱，離心機，倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱，冷藏器及消毒好的無菌物品等。
  3、操作間：普通培養(yǎng)箱，離心機，水浴鍋，定時鐘，普通天平及日常分析處理物。
  4、洗刷消毒(disinfection)間：烤箱，消毒鍋，蒸餾水(distilled water)處理器及酸缸等。
  5、分析間：顯微鏡，計算機及打印機等。
 

　　三、培養(yǎng)器皿
  常用細胞培養(yǎng)器皿有培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)板，培養(yǎng)皿等。常準備量是使用量的三倍，器皿應(yīng)選擇透明度好，無毒，利于細胞粘附和生長的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種：
  1、液體儲存瓶：用于儲存各種配制好的培養(yǎng)液，血清等液體，常用規(guī)格(specifications)有500ml，250ml，100ml等幾種.
 
  2、培養(yǎng)瓶：根據(jù)培養(yǎng)細胞種類要求不同培養(yǎng)瓶的形態(tài)（pattern)各異，用于細胞傳代培養(yǎng)的細胞要求瓶壁厚簿均勻，便于細胞貼壁生長和觀察，瓶口要大小一致，口徑一般不小于1cm，允許吸管伸入瓶內(nèi)任何部位,規(guī)格有200ml，100ml，50ml，25ml，10ml等幾種。
 
  3、培養(yǎng)皿：用于開放式培養(yǎng)及其它用途，分直徑30mm，60mm，120mm等幾種。
 
  4、吸管：常用的有長吸管和短吸管兩類，長吸管也稱刻度吸管。其改良后管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用于移動液體。常用1ml和10ml兩種，短吸管也叫滴管，分彎頭和直頭兩種。
 
  5、離心管：離心管是細胞培養(yǎng)中使用**廣泛的器皿，根據(jù)用途不同形態(tài)各樣，常用于細胞培養(yǎng)的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類.前者分別為50ml，30ml，15ml；后者則多為10ml和5ml。凈化工作臺的原理：潔凈環(huán)境是在特定的空間內(nèi)，潔凈空氣(進濾空氣)按設(shè)定的方向流動而形成的。以氣流方向來分，現(xiàn)有的超凈工作臺可分為垂直式，由內(nèi)向外式以及側(cè)向式。
 
  6、其它：如三角燒瓶，燒杯，量筒，漏斗，注射器等。
 

　　四、細胞培養(yǎng)溫度
  1、維持培養(yǎng)細胞旺盛生長，必須有恒定而適宜的溫度（temperature)。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求也不同。
 
  2、人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為36.5℃±0.5℃，偏離這一溫度范圍，細胞的正常(normal)代謝(metabolism)會受到影響，甚**死亡。
 
  3、培養(yǎng)細胞(cell)對低溫的耐受力較對高溫(high temperature)強，溫度上升不超過39℃時，細胞代謝與溫度成正比；人體細胞在39-40℃1小時，即能受到一定損傷，但仍有可能恢復；在40-41℃1小時，細胞會普遍受到損傷，僅小半數(shù)有可能恢復；41-42℃1小時，細胞受到嚴重損傷，大部分細胞死亡，個別細胞仍有恢復可能；當溫度在43℃以上1小時，細胞全部死亡。凈化工作臺的原理：潔凈環(huán)境是在特定的空間內(nèi)，潔凈空氣(進濾空氣)按設(shè)定的方向流動而形成的。以氣流方向來分，現(xiàn)有的超凈工作臺可分為垂直式，由內(nèi)向外式以及側(cè)向式。相反，溫度不低于0℃時，對細胞代謝雖有影響，,但并無傷害作用；把細胞放入25-35℃時，細胞仍能生存和生長，但速度減慢；放在4℃數(shù)小時后，再回到37℃培養(yǎng)，細胞仍能繼續(xù)生長。
 
  4、細胞代謝(metabolism)隨溫度降低（reduce)而減慢。當溫度降**冰點以下時，細胞可因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡。但是，如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護(bǎo hù )劑(二甲亞砜或甘油)，可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存。
 

　　五、合適的氣體環(huán)境
  1、氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳(CO2)。凈化工作臺用途：廣泛適用于醫(yī)藥衛(wèi)生、生物制藥、食品、醫(yī)學科學實驗、光學、電子、無菌室實驗、無菌微生物檢驗、植物組培接種等需要局部潔凈無菌工作環(huán)境的科研和生產(chǎn)部門。也可連接成裝配生產(chǎn)線具有低噪聲、可移動性等優(yōu)點。氧氣參與三羧酸循環(huán)，產(chǎn)生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。開放培養(yǎng)時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中。二氧化碳既是細胞代謝產(chǎn)物，也是細胞生長繁殖（fán zhí）所需成分，它在細胞培養(yǎng)中的主要作用在于維持培養(yǎng)基的pH值。
 
  2、大多數(shù)細胞的適宜pH為7.2-7.4，偏離這一范圍對細胞培養(yǎng)將產(chǎn)生有害的影響。但細胞耐酸性比耐堿性大一些，在偏酸環(huán)境(environment) 中更利于細胞生長。但有一些細胞也喜歡(Toasting likes)偏堿環(huán)境中生長，如成纖維細胞**適合pH是7.4-7.6。每種細胞都有其**適氫離子濃度指數(shù)。

具體可參考：